泰儿图新闻

21,9, 2018

泰数据 | 新产品新数据,新产品新数据,GABA能探针mDlx邂逅光遗传



自从泰儿图的mDlx 增强子新产品上市以后,不断收到各大实验室的最新数据反馈,今天要跟大家分享的是AAV-mDlx-hChR2(H134R)-EGFP-ER2这条载体的新鲜热辣实验图谱,GABA能神经元与光遗传学研究的一场邂逅将擦出怎样的火花?实在令人期待!


我们还是老规矩,先看结果!





实 验 信 息

载体货号 S0514-9

载体全名 AAV-mDlx-hChR2(H134R)-EGFP-ER2

动物种类 SD Rat

注射区域 Sepatal

注射体积 300nl

病毒滴度 ≥1E+13 V.G./mL

表达时间 4 weeks

结果描述 High Expression





病毒载体注射在Septal位置,3周后,埋置光纤,紧接着1周后,光遗传进行行为测试。

随后PBS灌注,4%PFA后固定,30%蔗糖,等到沉糖后冰冻切片染色,结果如下:




病毒高效表达,光纤位置准确







病毒的神经末端表达也OK






(相关实验数据尚未发表,为保护用户隐私,隐去了部分实验细节)



该结果与往期推文中J.Dimidschstein等人的实验验证的类似,携带mDlx增强子的新型AAV病毒载体,它能限制基因表达到GABA能中间神经元。这种载体的表达强效又具有特异性,可以实现形态学可视化,实时动态检测和操纵小鼠等多种物种的中间神经元。





我们先看看以往常用的识别和操纵GABA能神经元策略:

1. 利用cre重组酶驱动报告基因的方法是借助AAV病毒标记GABA能细胞。但是单一的基因和单一的细胞类型可能并不是特别匹配,多数情况下是在单一基因下标记多个细胞类群。

2. 利用cre,Flp或其他重组酶的交叉策略,提高细胞定位的精确度,共标及非共标的细胞类群;但是现有的多重组合还是很有限的。

3. 转录因子通常只在祖细胞中起作用,在成熟的神经元中会减少表达甚至改变表达模式。

4. 利用现有的能定位GABA能神经元的转基因小鼠,做这些细胞的基因表达谱,有可能定位其中更少的细胞类型。


由此可见mDlx增强子推出的意义:

1. 突破了在非转基因动物中不能精确识别和操纵GABA能神经元类型的限制。

2. AAV装载容量很有限(~4.7kb),只能通过短小的顺势调控序列限制在特定的细胞中表达。而增强子是包含转录因子结合位点的顺式作用元件,其负责基因表达的组织特异性转录调控。

3. Dlx作为一个有效的工具,被有效证明可用来研究多种物种的海马,皮层和纹状体的抑制性GABA功能,甚至在临床研究中都具有有较强的潜在效用。



目前泰儿图已经针对mDlx增强研发出了一系列新产品,军火库弹药充足,只缺您的课题思路!




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