常见技术问题答疑

26,6, 2018

病毒使用安全须知

一般认为AAV病毒本身对人体不致病。一般AAV病毒载体的生物安全等级是BSL1。但是对于携带致病基因或有害因子基因的AAV载体则应归于BSL2,应遵守以下操作注意事项:


1. 在相应的生物安全等级环境和要求下进行操作。

2. 避免与制品直接接触(经伤口或不小心针刺注入、误食、大量吸入、粘膜接触等)。

3. 在操作过程中不慎皮肤接触或溅入眼睛,立即用大量清水冲洗;

4. 乙醇、乙醚、氯仿等有机溶剂无法灭活AAV病毒,因此酒精消毒对于去除AAV病毒沾染无效。消毒可以采用的手段包括清水清洗、高压、强氧化性的消毒液(如巴斯消毒液)清消、强碱性液体浸泡等。


以下摘选自文献:

腺相关病毒的特性及应用进展,石亮,医学综述(Medical Recapitulate),2016


 过去的十年中,AAV作为载体在临床医学和基础研究中取得了重大的成果。目前在开发AAV的治疗产品中,主要的挑战需要克服AAV在宿主体内引起的免疫反应,这样才能进行安全、有效的基因治疗。研究表明,AAV引起的免疫主要有以下几方面的原因:之前感染AAV而引起的免疫反应;给药途径;病毒的剂量;AAV血清型;宿主特异性;目的基因表达的动力学。那么如何克服,首先可以控制AAV的注射剂量,每千克按照lx1012病毒基因组拷贝数为动物注射的中等剂量,每千克1x1013病毒基因组拷贝数及以上为高等剂量,可以在保证效率的前提下在中低等剂量上进行实验。也可以少量多次的给药,或者采取不同的给药方式。还可以适当地注射或者服用免疫抑制剂。再次可以改造AAV,重组的AAV可以改变其衣壳结构和表达元件进而减轻体液免疫和细胞免疫。提高AAV的靶向性,可以根据不同的组织选择不同血清型病毒,还可以针对某个器官组织使用特定的启动子。改造病毒的衣壳蛋白,从而降低重组蛋白的免疫原性。


021-59923117

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