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AAV应用在神经系统的常用方法与注意事项

启动子与血清型

文字:[大][中][小] 2016-10-15    浏览次数:951    

启动子:

启动子是基因的一个组成部分,控制基因表达的起始时间和表达的程度。启动子是位于结构基因5’端上游的DNA序列,

它本身并不控制基因活动,但是能与转录因子这种蛋白质结合,指挥着RNA聚合酶的活动,从而指导RNA复制。因此通过

选择对于细胞种类有特异性的启动子,可以将各种基因操作限制在特定种类的细胞里,从而特异地研究这一类细胞的功

能。


神经系统通常用启动子


1. hSyn启动子

hSyn启动子来自人突触蛋白1型(human Synapsin ,SYN1)基因的启动子,由于SYN1基因蛋白Synapsin参与突触前囊泡释放过程,所以是神经元特异启动子


2. CaMKIIα启动子-前脑兴奋性神经元启动子

CaMKIIα启动子来自小鼠Ca2+/调钙蛋白激酶2型α亚基启动子。在小鼠前脑,CaMKIIa特异地表达在兴奋性神经元(即谷氨酸能神经元)中,因此CaMKIIa启动子能作为前脑兴奋性神经元特异性启动子。


3. GFAP启动子-星形胶质细胞特异性启动子

GFAP启动子为胶质原纤维酸性蛋白(Glial Fibrillary Acidic Protein,GFAP)基因的启动子。GFAP是星形胶质细胞(astrocyte)的标志蛋白,所以它的启动子具有星形胶质细胞的特异性。


广谱启动子


1. CMV启动子-真核基因表达的有力量的启动子

CMV启动子多种类型的细胞的影响条件下均有很强活性。


2. CAG启动子-人工构建的强启动子

CAG启动子是人工构建的组合启动子,由巨细胞病毒(the cytomegalovirus,CMV)早期增强子(early enhancer element)和鸡β-肌动蛋白(chicken beta-actin)启动子组成,用于驱动基因在哺乳动物载体的高水平表达。


3. EF1α启动子-人工构建的强启动子

EF1α是一种构建核苷酸序列的启动子,属于广泛表达的类型。


AAV 血清型:

在神经科学领域常用的血清型有AAV1,2,5,8,9,根据表达水平可以大致分为三类:

低水平表达:AAV2,5;

水平表达:AAV1,8;

高水平表达:AAV9;

我们的建议是,按照您感兴趣的脑区搜索文献,找到其他实验室的成功案例后参考多数使用的血清型进行您的试验。

如果您并不清楚该选择哪种血清型,欢迎您向我们咨询。


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